Готовим инокуляционный материал

Дата создания : 2015-07-19 Просмотров : 5849 Комментарий : 0

Вы получили споровый отпечаток и не знаете что с ним делать? С чего начать? Тогда эта статья именно для Вас! Усаживаемся поудобнее и читаем....

Выращивание мицелия в жидкой среде (жидкий мицелий)

     Использование мицелия выращенного в жидкой среде облегчает и ускоряет процесс инокуляции субстрата, значительно возрастает скорость колонизации в отличии от использования споровой взвеси.

     Покупаем в аптеке:

   Жидкость для инъекций, или физраствор (что-нибудь самое дешевое), так как вам потребуется только бутылка! Подобные лекарства продаются в 400 мл. и 200 мл. бутылочках с резиновой пробкой и два шприца, один  из них должен быть 20 куб.

   Снимаем алюминиевый кружок в центре пробки, но не трогайте алюминиевый ободок, который удерживающий пробку.

   С помощью двух иголок и одного шприца (20куб.) выкачиваем из бутылочки все лекарство. Вставьте одну иглу в пробку, без шприца, а с помощью второго шприца вталкивайте воздух в бутылку. В результате избыточного давления лекарство полностью удаляется из бутылки. Это займет не много времени.

   Переверните бутылку вверх ногами, для того, чтобы жидкость вытекала.
После того, как вся жидкость удалена закачайте 100 мл. чистой воды и хорошенько потрусите бутылку. Так вы промоете ее от остатков лекарства. Процедуру желательно повторить хотябы 2 раза.

   Бутылка готова, теперь нужно приготовить питательный раствор. Главную роль в питании грибов играют соединения, содержащие углерод. Наиболее доступные источники углеродного питания - это простые сахара в виде глюкозы, фруктозы, ксилозы и мальтозы.
Заменить фруктозу можно любым из вышеперечисленных сахаров.
Так же для этих целей можно использовать обыкновенный мед.

Плюсы и минусы:& lt;/span>

Мёд

   Мед можно использовать абсолютно любой (даже засахаренный).

Плюсы:
   На меде мицелий вырастет быстрее, в большем количестве и более плотный, чем на фруктозе.

Минусы:
   Мед бывает разный: липовый, гречишный, цветочный и т.д., в зависимости от этого, мицелий может расти по-разному.
   Мед неудобно дозировать, трудно установить концентрацию раствора.
   Раствор иногда получается мутным. Из-за этого бывает затруднительно разглядеть в растворе мицелий на ранней стадии развития.
   Раствор меда всегда имеет желтоватый оттенок, поэтому бывает трудно определить цвет мицелия, а это затрудняет выявить возможное заражение.

Фруктоза

   Фруктоза продается в отделах продуктов для диабетиков в крупных супермаркетах, и в специализированных магазинах для диабетиков.

Плюсы:
   Вся фруктоза одинаковая, разница лишь в упаковке
   Фруктозу легко дозировать, используя весы. Потому вы без проблем получите необходимую концентрацию раствора.
   Раствор фруктозы получается абсолютно прозрачным, что облегчает обнаружение в нем мицелия на ранних стадиях развития. Также, в прозрачном растворе легко определить цвет мицелия.
   В растворе фруктозы, мицелий вырастает более «жидким», что это в свою очередь облегчает его всасывание через иглу шприца, которым в дальнейшем вы будете проводить инокуляцию.
Минусы:
   Не обнаружено.

  Подобьем итог: если ваша цель - размножение мицелия для инокуляции им субстрата, а не выращивание мицелия в больших объемах, для экстракции, то фруктоза лучше мёда.

Готовим раствор:

   Если используете бутылочку 200мл - готовим 100-150 мл раствора, если же бутылка 400мл - до 300 мл. (2/3 объема). Полностью растворите фруктозу/мёд в воде (концентрация 2 грамма фруктозы, или 10 грамм мёда на 100 мл. воды). Более высокая концентрация фруктозы приведет к образованию более «жидкого» мицелия, то есть при приготовлении 4 % раствора фруктозы, мицелий, даже через длительный промежуток времени, будет легко засасываться в шприц через иглу. А при пониженной концентрации, мицелий будет образовывать довольно плотные сгустки, которые очень трудно втягиваются через иглу, но зато в таком виде мицелий будет храниться дольше. Закачиваем раствор в бутылку. Для этого также, лучше использовать две иглы и один шприц. Вторая игла, позволит воздуху выходить из бутылки, не образовывая избыточного давления.

   Совет! Не заполняйте бутылочку раствором более чем на 2/3, при дальнейшей стерилизации, в результате нагревания, алюминиевый ободок который удерживает пробку, может не выдержать и слететь вместе с резиновой пробкой. 

   Совет! При использовании мёда профильтруйте раствор через 2-3 салфетки 2-3 раза и раствор будет кристально прозрачным.

   Раствор в бутылке - переходим к стерилизации. Стерилизовать бутылочку, можно как в кастрюле, так и в скороварке (скороварка разумеется более надежна). Стерилизацию следует проводить не дольше 30 минут, иначе может произойти карамелизация фруктозы/мёда и ничего не вырастет. После стерилизации дайте бутылочке остыть естественным путем до комнатной температуры. После производим инокуляцию споровой взвесью, которую мы уже приготовили по инструкции выше и помещаем бутылочку в теплое (~ 25°C), темное место. Не беспокойте ее  в течении хотябы 2-3 суток. Обычно. спустя сутки, мицелий начинает активно развиваться, но может быть и так, что первые признаки мицелия вы обнаружите только на 5-7 день. В любом случае, контрольный срок - неделя, если за это время ничего не произошло и раствор по-прежнему прозрачный - переделываем все с начала.

Вот что у вас должно получится в итоге:
     
   Приготовленный таким способом жидкий мицелий надо хранить в холодильнике. Гарантированный срок хранения 2 месяца. После почти полной колонизации жидкости храните бутылку при температуре ~ +10°C.

 

Приготовление споровой взвеси

   Все действия, описанные ниже, надо делать максимально быстро, чтобы избежать попадания сторонних микроорганизмов в шприц.

   Протрите спиртом все инструменты, руки (если вы не используете стерильные перчатки) и поверхность над которой будете готовить взвесь непосредственно перед приготовлением. Идеальное место для проведения данной процедуры - прогретая на максимальной температуре в течении 20 минут духовка. Разумеется после того как прогрели - дайте ей остыть, затем откройте и на противене совершите все описанное ниже.

Вытягиваем поршень из шприца и соскребаем 1/6 - 1/4 (зависит от размеров ) отпечатка спор в шприц.

споровый отпечаток

   Заталкиваем поршень на место. Для соскабливания спор я использую небольшой нож. Так же можно использовать швейную иглу, но не используйте иглу от вашего шприца.
   Снимите колпачок с иглы и медленно выпустите воздух из шприца (споры останутся внутри). Протрите иглу спиртом.
   Наберите в шприц 5 мл воды для инъекций ( продается в аптеках в ампулах по 5 мл или бутылях).

   Взвесь готова.

   Хорошенько разболтайте получившееся и положите в сухое, темное место минимум на 12-24 часа перед использованием. Таким образом ваша взвесь регидрируется.

Оставить комментарий

Captcha


Подарок каждому покупателю!

Никто не останется без подарка от PsyFairy

Работаем 24/7

Отправка заказов по всему миру

Panel Tool

Reset